百科首頁(yè) > 正文

可溶性蛋白質(zhì)（篩選抗性的指標之一）

次瀏覽 | 更新時(shí)間：2023-05-23

來(lái)源：網(wǎng)絡(luò )整理

精選百科

本文由作者推薦

可溶性蛋白質(zhì)

篩選抗性的指標之一

可溶性蛋白是重要的滲透調節物質(zhì)和營(yíng)養物質(zhì)，他們的增加和積累能提高細胞的保水能力，對細胞的生命物質(zhì)及生物膜起到保護作用，因此經(jīng)常用作篩選抗性的指標之一。

基本信息

中文名	可溶性蛋白質(zhì)
外文名	Soluble protein
拼音	kerongxingdanbaizhi
特點(diǎn)	以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑
應用	植物生理、微生物
實(shí)驗	考馬斯亮藍G-250法

收起

解釋

可溶性蛋白指可以以小分子狀態(tài)溶于水或其他溶劑的蛋白。通常在植物生理、微生物、食品加工等實(shí)驗中作為重要指標。如可溶性蛋白是植物抗旱性的重要指標之一。

測定

原理

考馬斯亮藍G－250(GooMAssIe BrIllIAnT Blue G－250)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結合法的一種。考馬斯亮藍G－250在游離狀態(tài)下呈紅色，在稀酸溶液中，當它與蛋白質(zhì)的疏水區結合后變?yōu)榍嗌罢咦畲蠊馕赵?65nM，后者在595nM。在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(1～100μg)，蛋白質(zhì)與色素結合物在595nM波長(cháng)下的光吸收與蛋白質(zhì)含量成正比，故可用于蛋白質(zhì)的定量測定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍G－250結合在2Min左右的時(shí)間內達到平衡，完成反應十分迅速，其結合物在室溫下1H內保持穩定。該反應快速靈敏(靈敏度比FolIn－酚法還高4倍)、易于操作、干擾物質(zhì)少(考馬斯亮藍G－250和蛋白質(zhì)通過(guò)范德華力結合，受蛋白質(zhì)的特異性影響較小，除組蛋白外，其他不同種類(lèi)蛋白質(zhì)染色強度差異不大)，可測定微克級蛋白質(zhì)含量，是一種比較好的蛋白質(zhì)定量法。但此方法也存在其缺點(diǎn)，考馬斯亮藍在蛋白質(zhì)含量很高時(shí)線(xiàn)性關(guān)系偏低，且不同來(lái)源蛋白質(zhì)與色素結合狀況有差異。

儀器與用具

721分光光度計；10Ml量筒1個(gè)；研缽；燒杯；量瓶；移液管：1Ml 3支，0?1Ml 3支；10Ml具塞刻度試管14支。

試劑

標準蛋白質(zhì)溶液：用牛血清白蛋白配成含蛋白質(zhì)100μg/Ml的標準蛋白溶液;

90%乙醇；

85%磷酸(W/V)；

考馬斯亮藍G－250溶液：稱(chēng)取100μg考馬斯亮藍G－250，溶于50Ml 90%乙醇中，加入85%的磷酸100Ml，最后用蒸餾水定容到1000Ml，貯放在棕色瓶中，此溶液在常溫下可放置1個(gè)月。

操作方法

1?標準曲線(xiàn)(蛋白質(zhì)含量為0～100μg/Ml)的繪制　取6支具塞試管，按表2－1數據配制含0～100μg/Ml的牛血清蛋白質(zhì)液各1Ml。

表2－1不同蛋白質(zhì)含量的牛血清蛋白質(zhì)液配制表

管號123456蛋白質(zhì)標準液（ml)00.200.400.600.801.00蒸餾水（ml)1.000.800.600.400.200蛋白質(zhì)含量（μg）020406080100在每支試管中加入5Ml考馬斯亮藍G－250溶液，蓋塞，反轉混合數次，放置2Min后，用1CM光徑比色杯在595nM下比色。以蛋白質(zhì)濃度為橫坐標，以吸光值為縱坐標繪制標準曲線(xiàn)。

2.樣品提取液中蛋白質(zhì)濃度的測定　吸取樣品提取液1.0Ml(樣品提取見(jiàn)LoWry法)，放入具塞試管中(每個(gè)樣品設置兩個(gè)重復)，加入5Ml考馬斯亮藍G－250溶液，充分混合，放置2Min后在595nM下比色，記錄吸光值，并通過(guò)標準曲線(xiàn)查得蛋白質(zhì)含量。

3.結果計算

樣品中蛋白質(zhì)的含量(Mg/g)=C×VTV1×FW×1000（2-2）

式中C：查標準曲線(xiàn)值(μg)；VT：提取液總體積(Ml)；

FW：樣品鮮重(g)； V1：測定時(shí)加樣量(Ml)。

可溶性蛋白質(zhì)相關(guān)的文章

野菊（菊屬多年生草本植物）

野菊（學(xué)名：Chrysanthemum indicum Linnaeus），又名山菊花、黃菊仔、菊花腦、瘧疾草，是菊科（Asteraceae）菊屬(Chrysanthemum)一種多年生草本植物。野菊分布較為廣泛，主要分布在印度、日本、朝鮮、韓國、中國，在中國主要分布在東北、華北、華中、華南及西南各

心肌缺血（心血管類(lèi)供血供氧不足造成的病理生理狀態(tài)）

心肌缺血（myocardial ischemia）又稱(chēng)為心臟缺血、缺血性心臟病，是一種心血管內心肌血流量不足引起的病理生理狀態(tài)。主要是因為供應心肌的冠狀動(dòng)脈因粥樣硬化或其他原因而導致冠狀動(dòng)脈血流完全或不完全阻塞，引起冠狀動(dòng)脈供血不足，不能滿(mǎn)足心肌代謝需要，心肌消耗其糖原儲備進(jìn)行無(wú)氧代謝。長(cháng)期吸煙或接

法西斯（極端獨裁的表現形式）

法西斯，（拉丁語(yǔ)fasces的譯音）原指中間插著(zhù)一把斧頭的“束棒”，為古羅馬執法官吏的權力標志。現象征強權、暴力、恐怖統治，對外侵略掠奪，是資本主義國家的極端獨裁表現形式。

庫車(chē)站（1998年建于新疆的三等站）

庫車(chē)站位于中國新疆維吾爾自治區阿克蘇地區，是中國鐵路烏魯木齊局集團有限公司管轄的三等站，建于1998年，建筑面積1818㎡。庫車(chē)站為庫車(chē)地區鐵路主要客貨運站，車(chē)站主要辦理銜接方向旅客列車(chē)的通過(guò)作業(yè)，以及庫車(chē)至阿克蘇、庫爾勒方向區段，摘掛列車(chē)的解編作業(yè)。

張騫出使西域（西漢的對外國策）

張騫出使西域，指的是漢武帝時(shí)期張騫兩次出使西域，開(kāi)辟通往西域道路的歷史事件。

浙江（中華人民共和國省級行政區）

浙江本詞條是多義詞，共2個(gè)義項中華人民共和國省級行政區浙江省，簡(jiǎn)稱(chēng)“浙”，省會(huì )杭州。浙江省境內最大的河流錢(qián)塘江，因江流曲折，稱(chēng)之江，又稱(chēng)浙江，省以江名。其地處中國東南沿海長(cháng)江三角洲南翼，東臨東海，南接福建，西與江西、安徽相連，北與上海、江蘇接壤。浙江地勢由西南向東北傾斜，地形復雜。山脈自西南向東北成大致平行的三支，有“七山一水兩分田”之說(shuō)。浙江屬典型的亞熱帶季風(fēng)氣候區。浙江是全國島嶼最多的省份，其