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免疫印跡（檢測復雜樣品中某種蛋白的方法）

次瀏覽 | 更新時間：2023-05-19

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免疫印跡

檢測復雜樣品中某種蛋白的方法

免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發(fā)光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。原理如圖

基本信息

中文名	免疫印跡
基本步驟	抗原分離、抗原印跡和抗原檢定
別名	蛋白質印跡
外文名	immunoblotting

基本介紹

可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。

基本原理

將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然后取固定化基質膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉移到印跡紙上, 并且固相化。最后應用免疫復蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。

優(yōu)點

免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優(yōu)點：

1、濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作；

2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔；

3、免疫印跡分析只需少量試劑；

4、孵育、洗滌的時間明顯減短；

5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析和鑒定；

6、結果以圖譜形式可長期保存；

7、免疫探針可通過降低PH值等方法, 象抹去錄音磁帶一樣將探針抹掉, 再換用第二探針進行分析檢測。免疫印跡法的應用范圍及優(yōu)點不僅局限于此, 它必將隨著這一方法的深入研究而不斷發(fā)展和完善。

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