有限稀釋法是一種常用的克隆方法,將需要再克隆的細胞株自培養孔內吸出并作細胞計數,計出1mL的細胞數。

正文

用HT培養液稀釋?zhuān)辜毎麧舛葹?0~60個(gè)/mL,于96孔培養板中每孔加0.1mL(五六個(gè)細胞/孔)。接種2排,剩余細胞懸液用HT培養液作倍比稀釋?zhuān)俳臃N2排,如此類(lèi)推,直至使每孔含0.5~1個(gè)細胞。培養7~10d后,選擇單個(gè)克隆生長(cháng)的陽(yáng)性孔再一次進(jìn)行克隆。一般需要如此重復3~5次,直至達100%陽(yáng)性孔率時(shí)即可,以確保抗體由單個(gè)克隆所產(chǎn)生。