(一)放大鏡的成像原理 表面為曲面的玻璃或其他透明材料制成的光學(xué)透鏡可以使物體放大成像,光路圖如圖1所示。位于物方焦點(diǎn)F以?xún)鹊奈顰B,其大小為y,它被放大鏡成一大小為y'的虛像A'B'。放大鏡的放大率 Γ=250/f' 式中250--明視距離,單位為mm f'--放大鏡焦距,單位為mm 該放大率是指在250mm的距離內用放大鏡觀(guān)察到的物體像的視角同沒(méi)有放大鏡觀(guān)察到的物體視角的比值。 (二)顯微鏡的成像原理 顯微鏡和放大鏡起著(zhù)同樣的作用,就是把近處的微小物體成一放大的像,以供人眼觀(guān)察。只是顯微鏡比放大鏡可以具有更高的放大率而已。圖2是物體被顯微鏡成像的原理圖。圖中為方便計,把物鏡L1和目鏡L2均以單塊透鏡表示。物體AB位于物鏡前方,離開(kāi)物鏡的距離大于物鏡的焦距,但小于兩倍物鏡焦距。所以,它經(jīng)物鏡以后,必然形成一個(gè)倒立的放大的實(shí)像A'B'。 A'B'位于目鏡的物方焦點(diǎn)F2上,或者在很靠近F2的位置上。再經(jīng)目鏡放大為虛像A''B''后供眼睛觀(guān)察。虛像A''B''的位置取決于F2和A'B'之間的距離,可以在無(wú)限遠處(當A'B'位于F2上時(shí)),也可以在觀(guān)察者的明視距離處(當A'B'在圖中焦點(diǎn)F2之右邊時(shí))。目鏡的作用與放大鏡一樣。所不同的只是眼睛通過(guò)目鏡所看到的不是物體本身,而是物體被物鏡所成的已經(jīng)放大了一次的像。
(三)顯微鏡的重要光學(xué)技術(shù)參數 在鏡檢時(shí),人們總是希望能清晰而明亮的理想圖象,這就需要顯微鏡的各項光學(xué)技術(shù)參數達到一定的標準,并且要求在使用時(shí),必須根據鏡檢的目的和實(shí)際情況來(lái)協(xié)調各參數的關(guān)系。只有這樣,才能充分發(fā)揮顯微鏡應有的性能,得到滿(mǎn)意的鏡檢效果。顯微鏡的光學(xué)技術(shù)參數包括:數值孔徑、分辨率、放大率、焦深、視場(chǎng)寬度、覆蓋差、工作距離等等。這些參數并不都是越高越好,它們之間是相互聯(lián)系又相互制約的,在使用時(shí),應根據鏡檢的目的和實(shí)際情況來(lái)協(xié)調參數間的關(guān)系,但應以保證分辨率為準。 1. 數值孔徑
數值孔徑簡(jiǎn)寫(xiě)NA,數值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數,是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低的重要標志。其數值的大小,分別標刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。數值孔徑(NA)是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率(n)和孔徑角(u)半數的正弦之乘積。用公式表示如下: 孔徑角又稱(chēng)"鏡口角",是物鏡光軸上的物體點(diǎn)與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度。孔徑角越大,進(jìn)入物鏡的光通亮就越大,它與物鏡的有效直徑成正比,與焦點(diǎn)的距離成反比。顯微鏡觀(guān)察時(shí),若想增大NA值,孔徑角是無(wú)法增大的,唯一的辦法是增大介質(zhì)的折射率n值。基于這一原理,就產(chǎn)生了水浸物鏡和油浸物鏡,因介質(zhì)的折射率n值大于1,NA值就能大于1。數值孔徑最大值為1.4,這個(gè)數值在理論上和技術(shù)上都達到了極限。2013年,有用折射率高的溴萘作介質(zhì),溴萘的折射率為1.66,所以NA值可大于1.4。這里必須指出,為了充分發(fā)揮物鏡數值孔徑的作用,在觀(guān)察時(shí),聚光鏡的NA值應等于或略大于物鏡的NA值。數值孔徑與其他技術(shù)參數有著(zhù)密切的關(guān)系,它幾乎決定和影響著(zhù)其他各項技術(shù)參數。它與分辨率成正比,與放大率成正比,與焦深成反比,NA值增大,視場(chǎng)寬度與工作距離都會(huì )相應地變小。 2. 分辨率
顯微鏡的分辨率是指能被顯微鏡清晰區分的兩個(gè)物點(diǎn)的最小間距,又稱(chēng)"鑒別率"。其計算公式是 式中σ為最小分辨距離;λ為光線(xiàn)的波長(cháng);NA為物鏡的數值孔徑。可見(jiàn)物鏡的分辨率是由物鏡的NA值與照明光源的波長(cháng)兩個(gè)因素決定。NA值越大,照明光線(xiàn)波長(cháng)越短,則σ值越小,分辨率就越高。要提高分辨率,即減小σ值,可采取以下措施(1)降低波長(cháng)λ值,使用短波長(cháng)光源。(2)增大介質(zhì)n值以提高NA值。(3)增大孔徑角u值以提高NA值。(4)增加明暗反差。 3.放大率和有效放大率
由于經(jīng)過(guò)物鏡和目鏡的兩次放大,所以顯微鏡總的放大率Γ應該是物鏡放大率β和目鏡放大率Γ1的乘積: 顯然,和放大鏡相比,顯微鏡可以具有高得多的放大率,并且通過(guò)調換不同放大率的物鏡和目鏡,能夠方便地改變顯微鏡的放大率。放大率也是顯微鏡的重要參數,但也不能盲目相信放大率越高越好。顯微鏡放大倍率的極限即有效放大倍率。分辨率和放大倍率是兩個(gè)不同的但又互有聯(lián)系的概念。有關(guān)系式: 當選用的物鏡數值孔徑不夠大,即分辨率不夠高時(shí),顯微鏡不能分清物體的微細結構,此時(shí)即使過(guò)度地增大放大倍率,得到的也只能是一個(gè)輪廓雖大但細節不清的圖像,稱(chēng)為無(wú)效放大倍率。反之如果分辨率已滿(mǎn)足要求而放大倍率不足,則顯微鏡雖已具備分辨的能力,但因圖像太小而仍然不能被人眼清晰視見(jiàn)。所以為了充分發(fā)揮顯微鏡的分辨能力,應使數值孔徑與顯微鏡總放大倍率合理匹配。 4. 焦深
焦深為焦點(diǎn)深度的簡(jiǎn)稱(chēng),即在使用顯微鏡時(shí),當焦點(diǎn)對準某一物體時(shí),不僅位于該點(diǎn)平面上的各點(diǎn)都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度內,也能看得清楚,這個(gè)清楚部分的厚度就是焦深。焦深大, 可以看到被檢物體的全層,而焦深小,則只能看到被檢物體的一薄層,焦深與其他技術(shù)參數有以下關(guān)系:(1)焦深與總放大倍數及物鏡的數值孔徑成反比。(2)焦深大,分辨率降低。由于低倍物鏡的景深較大,所以在低倍物鏡照相時(shí)造成困難。在顯微照相時(shí)將詳細介紹。 5. 視場(chǎng)直徑(Field Of View)觀(guān)察顯微鏡時(shí),所看到的明亮的圓形范圍叫視場(chǎng),它的大小是由目鏡里的視場(chǎng)光闌決定的。視場(chǎng)直徑也稱(chēng)視場(chǎng)寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場(chǎng)內所能容納被檢物體的實(shí)際范圍。視場(chǎng)直徑愈大,愈便于觀(guān)察。有公式式中F: 視場(chǎng)直徑,FN:視場(chǎng)數(Field Number, 簡(jiǎn)寫(xiě)為FN,標刻在目鏡的鏡筒外側),β:物鏡放大率。由公式可看出:(1)視場(chǎng)直徑與視場(chǎng)數成正比。(2)增大物鏡的倍數,則視場(chǎng)直徑減小。因此,若在低倍鏡下可以看到被檢物體的全貌,而換成高倍物鏡,就只能看到被檢物體的很小一部份。 6. 覆蓋差 顯微鏡的光學(xué)系統也包括蓋玻片在內。由于蓋玻片的厚度不標準,光線(xiàn)從蓋玻片進(jìn)入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變,從而產(chǎn)生了相差,這就是覆蓋差。覆蓋差的產(chǎn)生影響了顯微鏡的成像質(zhì)量。國際上規定,蓋玻片的標準厚度為0.17mm,許可范圍在0.16-0.18mm,在物鏡的制造上已將此厚度范圍的相差計算在內。物鏡外殼上標的0.17,即表明該物鏡所要求的蓋玻片的厚度。 7. 工作距離WD 工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。 三招巧記成像規律
在透鏡知識的學(xué)習中,凸透鏡成像規律及其應用是一個(gè)重點(diǎn)內容,盡管我們都是通過(guò)實(shí)驗來(lái)研究凸透鏡的成像情況的,但在實(shí)際練習時(shí)仍然會(huì )把規律遺忘導致做題時(shí)感到困難。現介紹幾招記憶技巧,供大家參考:
第一招:列表記憶法(f為凸透鏡的焦距)
由凸透鏡成像的規律表可以看出:
1. 凸透鏡成實(shí)像的特點(diǎn)是物體在焦點(diǎn)以外。當物體從2倍焦距以外向焦點(diǎn)移動(dòng)的過(guò)程中,物距逐漸減小,像距逐漸增大,像也逐漸變大,像和物體一定在凸透鏡的異側,并且像是倒立的。
2. 凸透鏡成虛像的特點(diǎn)是凸透鏡成虛像時(shí),像和物體一定是在透鏡的同側,并且像是正立、放大的。
3. 從表中看出,有三個(gè)“沒(méi)有”:沒(méi)有正立的實(shí)像;沒(méi)有倒立的虛像;沒(méi)有縮小的虛像。

透鏡成像規律
第二招:數軸記憶法說(shuō)明:
1. 焦點(diǎn)F是凸透鏡成實(shí)像和虛像的分界點(diǎn)。
當物體放在凸透鏡的焦點(diǎn)上(即物距u等于焦距f)時(shí),既不成實(shí)像也不成虛像,因為從焦點(diǎn)發(fā)出的光線(xiàn)經(jīng)過(guò)凸透鏡折射后與主光軸平行射出,平行光不能相交,所以不能成像。 當物體放在焦點(diǎn)以外時(shí)成實(shí)像,當物體放在焦點(diǎn)以?xún)葧r(shí)成虛像,即物體成像以焦點(diǎn)F分為界點(diǎn),分成虛像和成實(shí)像的區域,物體的位置分別在成虛像和實(shí)像的區域時(shí),所成的像就對應數軸圖上的規律。
2. 2倍焦距處是凸透鏡成放大實(shí)像和縮小實(shí)像的分界點(diǎn),物體在2倍焦距處成等大的實(shí)像,在2倍焦距以外成縮小的實(shí)像,在1倍和2倍焦距之間成放大的實(shí)像。

透鏡成像規律
第三招:口訣記憶法由列表和圖象記憶法中可以歸納出下面的簡(jiǎn)單口訣:
1倍焦距分虛實(shí),2倍焦距分大小;
實(shí)像與物異側倒,物遠像近像變小;
虛像與物同側正,巧記口訣活用好。